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本制品是一种核酸内切酶，能够裂解DNA中的磷酸二酯键，生成带有5'-磷酸和3'-羟基末端的寡核苷酸。dsDNase能够特异性的消化双链DNA（double-stranded DNA,dsDNA）而不会消化单链DNA、引物、探针和RNA。dsDNase具有热敏感性，可在55℃条件下快速失活。dsDNase主要用于反转录实验前快速去除RNA样本中的基因组DNA污染，与传统的使用DNase I去除基因组DNA污染的方法相比，无需额外加入EDTA失活，可减少对RNA的损伤，同时节省实验时间，保证RNA水平定量的准确性。

• 抑制条件：金属离子、EDTA、SDS、DTT、β-巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制dsDNase的活性；
  
• 失活条件：55℃温育5min。

• 蛋白质纯度：通过SDS-PAGE并考马斯亮蓝染色，该酶纯度≥90%。
  
• RNA酶活性检测：将酶液与RNA底物在37℃温育1h，通过凝胶电泳检测没有发现RNA底物降解。
  
• 功能检测：该产品被用于测试去除来自RNA样本中的基因组DNA并进行了RT-qPCR扩增，发现去除率≥99.9%。RNA数量不受dsDNase处理的影响。

• 若RNA样本下游用于RT-PCR，且目的基因长度≥3kb，失活步骤前需添加终浓度为10mM的DTT；
  
• 为避免RNA降解，可在反应体系中加入适量的RNase Inhibitor。

• 于冰上配制如下反应体系：
  

  成分		用量
  dsDNase		1μL
  10×dsDNase Buffer		1μL
  样本RNA	总RNA	1pg～5μg/10μL
  	mRNA	0.1pg～500ng/10μL
  	特异性RNA	0.01ng～500ng/10μL
  Nuclease-Free Water		至10μL

• 轻轻吹打混匀反应体系后，将以上混合液在37℃温育2～5min；
  
• 65℃热失活2min，迅速将获得的RNA置于冰上，用于后续实验。
  
  • 长期保存请置于-80℃，避免反复冻融。

• RT-qPCR实验NTC对照有扩增
  
  • gDNA污染较为严重，反应时间不足。
    建议：延长孵育时间至5min。
    
  • RNA模板中存在较高浓度抑制剂影响dsDNase酶活。
    建议：使用75%无水乙醇洗涤RNA模板，并溶解于无核酸酶水中。